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【摘要】 目的 调查医院肺炎克雷伯菌（Kp）的耐药现状，为指导临床合理使用抗菌药物提供科学依据。方法 用纸片扩散法（K-B法）对Kp进行14种抗菌药物的敏感性试验，产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）的筛选按美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）推荐的纸片确证法进行。结果 2003～2006年从临床标本中共分离到Kp 97株，其中产ESBLs阳性25株。除亚胺培南外对其他13种抗生素均有不同程度耐药，头孢类药物耐药率较高。结论 黑河市Kp的耐药情况十分严重，有必要对Kp进行耐药性动态监测，以指导临床用药。
【关键词】 黑河市； 肺炎克雷伯菌； 耐药性
近年来，肺炎克雷伯菌（Kp）已成为医院感染常见的条件致病菌，常引起呼吸道感染。随着高效广谱抗菌药物的广泛应用，Kp某些菌株对头孢菌素及喹诺酮类药物获得性耐药。为了解本市Kp的耐药现状，为临床合理使用抗菌药物提供依据，我们对本院分离的97株Kp进行了检测。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 肺炎克雷伯97株来自我院2003年2月～2006年4月住院和门诊患者痰、咽拭子、尿液、脓液等标本。质控菌株大肠埃希菌ATCC 25922、肺炎克雷伯菌ATCC 700603，购自卫生部临床检验中心。
1.2 细菌鉴定 按《全国临床检验操作规程》鉴定，最后用法国生物梅里埃API-20E系统确证。
1.3 药敏试验 采用NCCLS推荐的K-B法进行，药敏纸片和M-H琼脂购自杭州天和微生物试剂有限公司。头孢他啶、头孢噻肟、头孢他啶/克拉维酸、头孢噻肟/克拉维酸纸片购自英国Oxoid公司。
1.4 ESBLs的检测
1.4.1 ESBLs初筛 选用头孢噻肟、头孢他啶、氨曲南（均为30μg/片）药敏纸片，用标准纸片扩散法测试抑菌圈的直径。采用NCCLS2002年版的标准进行判断。凡头孢他啶的抑菌环直径≤22mm，头孢噻肟或氨曲南≤27mm，均应高度怀疑产ESBLs株，进一步做确诊试验。
1.4.2 ESBLs确证试验 用头孢他啶（30μg/片）和头孢他啶/克拉维酸（30μg/10μg/片）、头孢噻肟（30μg/片）和头孢噻肟/克拉维酸（30μg/10μg/片），分别测试其抑菌环的直径（药敏纸片均为英国Oxoid公司产品）。当两种药物中任意一种加克拉维酸与不加克拉维酸的抑菌圈直径差≥5mm时，可确认为产ESBLs株。
2 结果
见表1、2。表1 临床标本Kp的检出率表2 97株肺炎克雷伯菌非产酶株与产ESBLs酶株的体外药敏试验结果注: S为敏感，I+R为耐药
3 讨论
近年来革兰阴性杆菌的耐药性十分严重，肺炎克雷伯菌在某些医院重症监护病房病原菌检出率已列第3位，且对多种常用抗菌药物耐药性呈明显上升趋势［1，2］。特别是近年来产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）株和产AmpC酶株的出现，引起了医药卫生界的高度关注。本研究结果显示，我院肺炎克雷伯菌主要来源于痰标本（52.6%）。提示医院感染管理机构应切实加强对患者呼吸道的护理和监控，有效的控制医院感染的发生。
ESBLs是由质粒介导的能水解氧亚氨基β-内酰胺抗生素，并可被β-内酰胺酶抑制剂（如克拉维酸等）所抑制的一类β-内酰胺酶。ESBLs能水解头孢噻肟、头孢他啶、头孢曲松等三代头孢及氨曲南等单酰胺类抗菌药物，给临床抗感染治疗造成极大困难［3，4］。ESBLs可以通过接合、转化和转导等形式使耐药基因在细菌中扩散，从一个细菌传递到另一个细菌，甚至在不同的菌种之间传递［5］。三代头孢菌素能够诱导肺炎克雷伯菌产生ESBLs，我院三代头孢菌素使用已非常普及，肺炎克雷伯菌产ESBLs率已达25.8%，对头孢菌素类、哌拉西林、妥布霉素、复方新诺明呈多重耐药，耐药率显著高于非产ESBLs肺炎克雷伯菌（P<0.01），可能与这些药物为本院常规用药，诱导产生耐药有关。本组结果表明亚胺培南对产ESBLs Kp具有很高的敏感性，建议治疗Kp感染首选亚胺培南。
细菌耐药性的增加在全世界都是个不争的事实，各地因使用的抗生素种类和习惯的差异，产ESBLs肺炎克雷伯菌分离率可能存在明显的不同。延缓细菌的耐药性的产生延长抗生素的使用寿命有赖于临床医生严格掌握抗生素使用指征。做好细菌耐药性监测，控制耐药菌株流行刻不容缓。
【参考文献】
1 陈民钧，王辉.中国重症监护病房革兰阴性杆菌耐药性连续7年监测研究.中华医学杂志，2003，83（5）：375-381.
2 王琴，姚智，杨萍，等.产超广谱β-内酰胺酶和质粒介导的AmpC酶肺炎克雷伯菌耐药性及基因型研究.中华医院感染学杂志，2005，15（3）:256-260.
3 彭少华，李从荣，施菁玲，等.产超广谱β-内酰胺酶细菌的检测及耐药性观察.中华检验医学杂志，2001，24（6）:350-352.
4 张淑兰，卢志慧.肺炎克雷伯菌耐药性变迁与抗菌药物用量变化的相关性分析.中华医院感染学杂志，2005，15（9）:1043-1046.
5 俞云松.超广谱β-内酰胺酶研究进展.中华医学杂志，2006，9（86）：641-644. |
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